摘要：目的：研究川芎中阿魏酸的提取工艺。方法：单因素实验确定川芎中阿魏酸的提取方法及溶剂， L9(33)正交试验表就溶剂浓度、溶剂加量和提取时间为考察因素进行三因素三水平正交试验，对阿魏酸提取率进行优化。结果：影响提取率的因素是：乙醇浓度>提取时间>溶剂用量。最佳水平组合是：80%乙醇，15倍量，回流3h。结论：川芎粉碎品用15倍量、80%乙醇微沸腾回流3h提取阿魏酸，工艺最佳。
　　关键词：川芎；阿魏酸；正交试验
　　
　　川芎药材为伞形科植物川芎（Ligusticum chuanxiong Hort）的干燥根茎。具有活血行气，祛风止痛等功效。用于月经不调、经闭痛经、胸胁刺痛、头痛以及风湿痹痛等症的治疗[1]。川芎的化学成分以苯酞衍生物、生物碱、酚酸类化合物为主，其中，酚酸类化合物主要有阿魏酸、咖啡酸、芥子酸及原儿茶酸等[2]。现代研究表明酚酸类化合物不仅具有显著的抗氧化、抗自由基、抑制低密度脂蛋白的氧化以及预防心血管疾病的作用，而且具有抗癌、抗炎症和抗血小板凝聚等功能，在医药方面有广泛的用途[3]。本试验的目的是通过单因素实验确定川芎中阿魏酸的提取方法及溶剂，在此前提下，用正交试验的方法优化阿魏酸提取的工艺路线。
　　
　　1 材料与仪器
　　
　　1.1 材料 川芎药材购自绵阳市药材公司，经鉴定为真品。
　　1.2 试药阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所)，其余试剂均为分析纯。
　　1.3 仪器 Unico 2100型紫外可见分光光度计； YP202N电子天平；FZ102型植物粉碎机。
　　
　　2 方法与结果
　　
　　2.1 川芎中阿魏酸的提取方法
　　川芎根茎于恒温干燥箱中60℃烘干至恒重，粉碎后过60目筛。取粉末3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，按不同条件加入提取溶剂， 用不同方法进行提取，过滤，并将提取液定容至50mL量瓶中，摇匀，进行测定。
　　2.2 对照品溶液的制备
　　准确称取阿魏酸对照品14mg，置于100mL容量瓶中，用80%乙醇溶解并定容，摇匀，得阿魏酸浓度为0.14mg/mL的对照品溶液，作为储备液，其他不同浓度的对照品溶液由储备液稀释得到。
　　2.3 标准曲线的绘制
　　精密移取“2.2”项所配的阿魏酸储备液一定体积于10mL容量瓶中，稀释，配成阿魏酸浓度分别为0.14、0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02mg/mL的对照品溶液，将上述对照品溶液在323nm波长处测定其紫外吸光度（分别平行测定3次），以吸光度对浓度进行线性回归，回归方程和相关系数分别为：
　　y=2.1857x+2.3907，R2=0.9982
　　2.4 提取液的测定
　　按“2.1”项下方法提取川芎中阿魏酸，然后用外标法对提取液中阿魏酸的含量进行测定。
　　2.5单因素试验
　　2.5.1提取溶剂的选择试验
　　取川芎生药粉末3.000g，精密称定，分别加入乙醇、甲醇、丙酮、水各50mL，回流提取60min，滤过，定容至50mL。采用紫外分光光度法测定其吸光度并计算提取率。结果表明：采用甲醇、乙醇作溶剂提取率较高，阿魏酸的提取率分别为528μg/g和520μg/g。考虑生产中生产成本的问题，选择乙醇作为川芎中阿魏酸的提取溶剂。
　　2.5.2提取方法的选择试验
　　精密称定川芎生药粉末3.000g，50mL 浓度为60％乙醇为溶剂，分别采用超声提取、回流提取、索氏提取法进行提取，过滤并将提取液定容至50mL，用紫外分光光度法测定阿魏酸含量，计算其提取率。结果表明：回流提取法优于超声提取法和索氏提取法，所以选择回流提取法作为川芎中阿魏酸的提取方法。
　　2.6正交试验
　　根据单因素试验的结果，选择影响阿魏酸提取效果各因素中有意义的水平做正交试验，对结果进行极差分析，以确定最佳提取条件。取川芎生药粉末9份，10.000g/份，以乙醇溶液浓度(A)、回流时间(B)、溶剂加量(C)为3个因素，每个因素选用3个水平，用L9(33)正交表进行试验。因素水平见表1，正交试验结果见表2。
　　由表2直观分析看，最佳回流提取工艺是A2B2C2， 即150ml的80%乙醇提取3h为川芎中提取阿魏酸的最佳工艺条件。影响阿魏酸提取率的主次因素为A>B>C。即乙醇浓度为最大影响因素，其次为提取时间和溶剂用量。
　　2.7 最佳提取工艺条件的验证
　　为进一步验证最佳工艺条件，按最佳水平组合， 即取川芎生药粉末10g，150mL的80%乙醇回流提取3h，重复试验3批，结果见表3。
　　
　　三批试验结果显示，阿魏酸收率均高于正交试验各试验号，证明在所试验的范围内，该工艺确实最佳。
　　
　　3 结论与讨论
　　
　　此次实验证明川芎中阿魏酸的最佳提取工艺条件为15倍量80%乙醇微沸腾回流提取3h。
　　本试验在前人研究基础上选用了简单的工作表，很可能还有更好的工艺条件没有包括在内。还可在此基础上设计更合理的正交表，找出更好的提取条件。此外，本实验川芎仅仅提取一次，药渣没有重复提取，也会影响收率。
　　黄国兴[4]等发现在有关的川芎药材提取、浓缩以及干燥过程中，为了获得较高的阿魏酸转移率，相关工艺的温度不宜超过80℃，加热时间不宜超过12h。本试验回流提取均在微沸腾条件下进行，可能造成了阿魏酸有所分解，因此寻找沸点更低、提取率更高的溶剂作为提取剂提取效果可能会更好。
　　
　　参考文献
　　[1]中国药典委员会. 中华人民共和国药典[S], 北京: 化学工业出版社, 2005: 28
　　[2]杨丽红,谢秀琼,万丽，等. 川芎化学成分研究[J]. 时珍国医国药, 2007, 18(7): 1576
　　[3]Cai Yi-zhong，Luo Qiong，Sun Mei , et al. Antioxidant Activity and Phenolic Compounds of 112 Traditional Chinese Medicinal Plants Associated with Anticancer[J]. Life Sciences，2004，74(17)：2157
　　[4]黄国兴，季芳，杨文丹. 川芎中阿魏酸的提取工艺研究[J]. 中国现代应用药学药志，2007，24(3):203.